梅克爾昨天說,維持與中國的合作是歐盟的重大戰略利益。
歷史都是相似的,照片中這位男士叫內維爾.張伯倫,他是英國二戰前的首相。畫面中他剛下從慕尼黑回到英國的飛機,手上拿的是後來惡名昭彰的《慕尼黑協議》-英法兩國抹不去的歷史汙點。但在當時,面對滿機場的媒體,張伯倫卻勝利式的揮舞著這張紙,宣告「這是我們這個時代的和平」。
時間回到1938年,第三帝國在這年已經併吞了奧地利,下一個劍指捷克斯洛伐克。希特勒已經不再需要躲藏在陰影中,他的牙和爪清晰顯露在世界前。然而1938年9月29日,張伯倫、希特勒、墨索里尼以及法國總理達拉第,四國元首在慕尼黑簽訂協議,要求捷克斯洛伐克必須把境內日耳曼人為主的領土(蘇台德區)割讓給德國,如果捷克拒絕,那麼德國出兵進犯時英法將不會協防。
當事國捷克既沒有代表在會議上,也無法對協議內容置喙一字,大國間赤裸的分贓遊戲。這是歐洲近代歷史最不光采的時刻之一,後來更有人以「西方的背叛」稱呼這一連串現實主義的操作。
後來,戰爭還是爆發了。張伯倫為此被後世貼上「姑息主義」、「懦夫」的標籤。
*
所謂的背叛在慕尼黑協議中有兩層,第一層是英法兩國當時和捷克簽有安全互助條約,任一方遭到攻擊,其他兩方都必須出手相助。但在慕尼黑英法卻拋棄了捷克,如果爆發戰爭,那是因為捷克不識大局、不願意配合和他們無關。把受害者推上加害者的位子,為了保全自己的利益犧牲盟友。
更陰暗的一層,則是希望藉由犧牲捷克,把德國的戰略重心導向東邊發展,讓斯拉夫人去煩惱。張伯倫或許沒有天真到誤信希特勒會乖巧得吃下捷克後就收手,但他卻打起讓蘇聯去對抗德國,英法在背後伺機而動的算盤。是以蘇聯同樣身為歐洲巨頭,卻未被受邀參與慕尼黑會議。
但張伯倫沒想到的是蘇聯更狠,隔年直接和德國簽訂德蘇互不侵犯條約,兩國聯手瓜分波蘭。大家要來玩是吧?我玩得比你更大。史達林來自鬥爭如吃飯的共產黨,這些陰暗心計他怎麼會看不明白?
張伯倫千方百計要避免戰爭,最後得到的獎賞就是戰爭以更快速更猛烈的方式來到你面前。世界對英法兩國「死道友不死貧道」、「別人的孩子死不完」作法給出了公正的回應。
*
張伯倫彬彬有禮,為人謙和,在黨內廣受下議院同僚的愛戴。他雖然因綏靖主義留下不可抹滅的汙點,但他仍是忠誠的愛國者,在退下首相職位後依然盡心輔佐繼任的邱吉爾,在生命最後的關頭還在協助處理政務,可謂鞠躬盡瘁。
另一方面,繼任的邱吉爾以酗酒聞名,他的性格孤僻、脾氣暴烈。和張伯倫比起來,邱吉爾就是個老粗,但這樣的他,卻帶領英國人民打贏了歷史上最大的戰爭。
紳士沒有不好,但面對惡棍時,比起紳士,直接對惡棍臉上一巴掌賞下去的老粗要靠得住多了。
同時也有6部Youtube影片,追蹤數超過14萬的網紅賢賢的奇異世界,也在其Youtube影片中提到,【都市傳說】 十個最恐怖的都市傳說 (二) 都市傳說失踪的小孩:https://www.youtube.com/watch?v=utOV4tYiaVw 都市傳說一二三木頭人:https://www.youtube.com/watch?v=HtBkvtYSloU 都市傳說通往異世界的電梯:h...
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西方墨點法怎麼看 在 王立第二戰研所 Facebook 八卦
講點中國的決策模式,跟這幾年我們怎麼去看中南海的變化,這樣大家比較不會用邪惡與否的道德觀點切入,未來會發生何事,我們應該準備什麼,心理較有底。
中國的領導班子,第一代是「共產國際」,多數都出國見過世面,非常清楚中國到底落後世界幾條街。建國後技術完全依靠蘇維埃支援,讓第二代有很多接受蘇俄訓練的專家,此時整個中國的國際觀還是很封閉的。
直到鄧小平掌握大局後,開始跟西方接觸,產生了類似清末的洋務派,都喝過洋墨水。這些人震驚於西方的富庶,深知國力的差距,鄧小平雖算是第一代出身,這些國際共產底子的,也曉得要聽這些接觸過世面的人。
到了江澤民跟胡錦濤,進入執行鄧「韜光養晦」政策時期。我們會發現,喝過洋墨水的影響力非常大,大到會去跟歐美日各國的政二代談生意,今年聽到拜登跟柯林頓家族的一些新聞,源頭來自此。
說白了就是出國留學,認識同學好朋友,大家一起利用中國的改革開放,賺錢發大財。沒錢就沒辦法發展,軍備也不能自主,什麼都甭提了。
但在這種金光閃閃的水面下,有一批人非常不滿。這群人我們俗稱「土共」,他們覺得共產黨已經資本主義化,對當權者的腐敗深惡痛絕。他們共同特點是
1.有第一代的老爸,天天聽長征故事,怎樣殺爆蔣介石、趕走美國人、嗆聲蘇俄的故事。聽多這種哄小孩睡覺故事的結果,就是對中國的實力有著錯誤認知。
2.腦袋實在不好,考試讀書沒辦法留洋,接不上西方人脈,在國內也考不上好的工科學校,當技術官僚也不成。但靠老爸,可以撈到個基層政治幹部。
3.為了在共黨內生存,完全學會老爸教的鬥爭技巧,但除此以外信任圈極小,對政治的理解全部是宮廷權鬥。
換言之,習近平上台後,土共勢力正式崛起。原本我們以為,江澤民可以有效控制他。再說,中國的技術跟資金已經完全依靠西方輸血,應該不會蠢到去翻桌對抗。
結果我們錯了,習近平用他國家賦予的權力,把所有反抗者都剷除了。而且他真的不在乎毀掉技術基礎,宰掉下金蛋的金融體系,「反正這些都不是我的人」。
從那些西方關係良好的外交官跟技術官僚,這幾年相繼宣布擁護中心,公開反對美國帝國主義這些老朋友後。許多人才驚覺狀況不對,但美國涉入的利益太大,科技電子新貴以及自由派,直到今天都還對中國有幻想。
結論可以下了
現在的中國完全是政治領導一切,用的是文革鬥爭那套,稍一不慎就會被敵對派系切成碎片,有識之士只能選擇出逃跟一起演戲。
習近平真的不知道中國的狀況嗎?可能真的不知道。各位,川普一天只會花30mins看memo,小布希也差不多這個時間。習近平會像雍正一樣批奏摺到過勞死?想太多。
當你身邊的人不敢講狀況,只敢揣摩上意,吹噓中國可以與美國一戰,打爆日本不是問題,收編小國回歸中華體系指日可待。老闆想聽,有誰敢講真話?
香港問題很單純,中國缺錢,新疆維穩一年用掉快台灣一半的預算,多餘產能要輸出,人民幣印過度只會通膨,所以想著要香港把錢輸血回中國。
但香港人知道,金融地位來是自由市場,讓你中南海政治控制,股市漲就得漲,債卷發就發,所有公司都國營加黨工監視,要你出錢就得出。
這樣不就完了?
習近平顯然不懂,他們的歷史認知,跟經濟史觀,讓他們認為這一切都是政治宰制出的,不聽話就殺,殺一個不成殺兩個,再不成殺一百。中國需要維穩跟擴軍,缺錢就是向邊陲吸血,如同古代各王朝對邊境強徵民夫跟重稅一樣。
習這幫人不會在乎,中華帝國主義外邊陲,賤民是死是活的。
大家猜猜看,他們認為下一個要被輸血回去的對象是誰?
西方墨點法怎麼看 在 厭世哲學家 Facebook 八卦
讀書有幾個階段:
第一個階段,對各種思想概念還模糊不清的時候,很容易東拉西扯,把表面上看起來類似的東西當成同一個概念來理解,以為自己已經融會貫通了;然而當你追問他的時候,他又說不出個所以然,這個時候你就會發現,他無法細緻地釐清各種概念之間的差異,也無法在理論上區分出層次。
第二個階段,靜下心來刻苦用功過後,終於有辦法掌握各種概念之間的區別,而且在腦中有一個清晰的理論架構;不管你怎麼問他,他都有辦法立刻釐清你的問題,而且還能從不同層面回答你。
在這個階段的人會有一種「大夢初醒」的感覺,因為他會發現,這個社會上大約有90%以上的人,腦袋根本不清不楚,即使是被譽為專家或大師的人,也可能只是在胡言亂語,看起來好像很厲害,但實際上只是在招搖撞騙罷了。
這個階段的人,也是最有批判性的人,他們最喜歡指出別人的說法是錯的,喜歡看那些招搖撞騙的人們,被逼露出馬腳的窘境。這麼做會有一種快感,好像只有他頭腦最清楚,好像全世界只有他會思考一樣,其他芸芸眾生都是盲目的。
為什麼我會這麼了解這種人?
因為我在這個階段停留了很久很久,而且自作聰明到了極點。說實在的,不是自己真的有多聰明,就只是想讓別人覺得我很厲害罷了,殊不知在別人眼中,我才是個蠢蛋。
在我人生失敗到極點、低潮到極點的時候,我開始重新思索「讀書」對我的意義究竟是什麼。很長的一段時間裡,讀書對我而言就只是為了得到更多知識,讓我思考得更快速、更銳利、更有批判性;但擁有這些知識、技術與思辨能力又怎麼樣?如果我此生再也沒有發揮這些能力的機會,該怎麼辦?學這些東西還有意義嗎?
莊子在〈列禦寇〉篇中說,有個人花了好幾年時間去學「屠龍」的技術,在學有所成之後,才發現世界上根本無「龍」可屠。既然如此,學這些「屠龍技」的意義到底是什麼?
我曾經因此而決定不再讀書了。讀書,簡直誤我一生;話雖如此,卻也不是說放下就能放下,於是我苦思又苦思。
這些思索,讓我的讀書人生進入了第三個階段——為自己而讀。
現在,我是用我的「人生」在試驗我所學到的哲學。舉個例子來說,我們不是都學過《莊子》的「庖丁解牛」嗎?假如我們不能做到跟庖丁一樣的程度,我們在這邊空談庖丁解牛的境界有多高,難道不是在嘴炮而已嗎?再舉個例子,我們上課都會教學生讀柳宗元的〈始得西山宴遊記〉,如果我們自己都做不到「心凝形釋,與萬化冥合」,那我們要怎麼跟學生解釋這到底是什麼樣一種境界?如果只會跟學生說這是「物我兩忘」的境界,結果自己根本沒體驗過,難道不是在自欺欺人嗎?
「厭世哲學家」粉絲專頁上所寫的東西,也是我這個「試驗」的一部分,相當於成果發表吧。我在這裡寫的東西通通都是我真實體驗到或感受到的東西,絕不搬弄什麼高超、新奇的理論或概念,不做任何學術上的考究與分析,也不想再跟網友爭辯什麼對或錯。這些對我來說都沒意義。我的文章難道是為了寫給別人看的嗎?才怪,我只是寫給我自己看而已。
老莊與孔孟真的有那麼大的差別嗎?不見得。儒家又真的跟墨翟楊朱水火不容嗎?也未必。東方與西方是兩種完全不同的思維方式嗎?也許是吧,但我為什麼不能讓它們在我身上互相印證呢?
寫了這麼多,我要說的只是,有建設性的批判意見,我會接受並思考;至於那種丟一兩句話,認為我在扭曲經典或古文,以為我是讀不懂或是誤解了文意,卻又說不出個所以然的意見,我就不多回應了,一方面也是因為真的沒時間啦!謝謝。
西方墨點法怎麼看 在 賢賢的奇異世界 Youtube 的評價
【都市傳說】 十個最恐怖的都市傳說 (二)
都市傳說失踪的小孩:https://www.youtube.com/watch?v=utOV4tYiaVw
都市傳說一二三木頭人:https://www.youtube.com/watch?v=HtBkvtYSloU
都市傳說通往異世界的電梯:https://www.youtube.com/watch?v=-WUniwB2LoY
拍攝途中發生些怪事。。。記得看到最後,午夜人,一個人的捉迷藏,查理查理挑戰, HenHenTV奇異世界#14
各位大家好,歡迎來到HenHenTV的奇異世界,我是Tommy
在Youtube上面有很多人玩關於都市傳說的驗證,也有很多很奇怪的事情發生,但是你知道這些遊戲的玩法嗎?和它背後的故事嗎?今天我們就來說十個最恐怖的都市傳說,如果你也喜歡這些奇異世界的影片,歡迎你訂閱HenHenTV。
好!我們開始吧~
很多都市傳說都有個共同點,就是召喚惡靈或是與地獄鬼魂有關的遊戲,這些召喚儀式不知道有何根據,很多也是在網上傳開來的,也有一些是真實發生過的案例。來,讓我來告訴你們。
5.午夜人
這是源自於西方都市傳說 The Midnight Man,聽說是召喚中世紀被殺死的異教徒亡靈,需要準備的道具有蠟燭一根,紙和筆,火柴,鹽,木門,你的血一滴,首先在紙上寫上你的名字,然後滴一滴血,關掉家裡所有的燈,然後在木門前點燃蠟燭,敲木門22下,記得最後一下需要在午夜十二點正敲,然後打開門,吹些蠟燭,把門關上,然後再次點燃蠟燭。這時午夜人已經被你召喚了,你需要在黑暗中躲藏它到3.33pm,如果覺得身邊的溫度突然間降低,或是蠟燭突然熄滅了,你需要在十秒內再次點燃蠟燭,為了防止被他抓到,需要用鹽做一個圈,然後你坐在裡面,直到3.33pm,如果你還活在就代表你贏了,如果輸了,他就會折磨你到死為止。
4.查理挑戰
這是來自墨西哥的都市傳說,查理charlie就是墨西哥惡魔的名字,玩的方法很簡單,準備一張紙和兩支筆,在紙的左上角和右下角寫上YES,另外一邊就寫NO,然後把兩支筆重疊做出一個十字,然後召喚說到:Charlie Charlie,Are you here?但是在墨西哥不是應該說西班牙話嗎?Charlie Charlie,estasaqui~ 如果筆自動轉去YES,就是召喚成功,有點好像是碟仙的感覺。不過他只能答yes和no,如果他不走,怎麼辦?還有誰會知道召喚來的是那個惡魔呢?可能只是身邊的鬼魂或邪靈。
3. 一個人的捉迷藏
它是源自於四國的降靈儀式,首先準備一個有手有腳的玩偶,一些米,紅線和針,刀或剪刀,還有一杯鹽水。首先先設定好一間避難的房間,這個地方需要打開燈,而且最好有神壇。首先必須把娃娃的棉花(內臟)拿出來,然後把米填充進去,放入自己的指甲,然後用紅線縫上(代表血管),多餘的紅線不要剪掉,直接纏在玩偶身上,幫玩偶取個名字,假設他叫OO。在凌晨三點,把玩偶放進裝滿水的浴缸(日本家大部分有浴缸吧),然後說:一開始XX當鬼,XX就是玩家本身,應該是日文來說吧:
XXの始まりは幽霊 (我沒有學過日文)重複三次
說完過後,把娃娃放回浴缸,然後關掉家裡所有的燈,記得打開電視機(為什麼?方便貞子來訪嗎)調到黑白雜訊畫面,然後從一數到十,回到浴缸對玩偶說:OO我找到你咯
OO 私はあなたをわずかに見つけた
然後用刀刺玩偶,接下來就和它說:這次換你來當鬼了
今度はあなたのための幽霊が
迅速帶著鹽水去到避難的房間,把燈關上,然後一定要保持安靜,過了一到兩個小時後,就含著鹽水到回浴室,把鹽水吐在玩偶身上,然後說:是我贏了三次
私は勝った X3
然後把玩偶弄乾,燒掉就算是遊戲結束。
很多人在玩的途中發生怪事,玩偶動了,電視有怪聲,或是聽到腳步聲等等。
西方墨點法怎麼看 在 黃鈺文Mickey Huang Youtube 的評價
哈囉~大家好 我是米奇,黃鈺文。4年前我辭掉了電視台的工作,一個人到了墨爾本打拼。一路上走來有很多的艱辛以及難忘的回憶,過程中也有很多人一直鼓勵我要拍片跟大家分享,只是我不是專業的YOUTUBER,所以一直很掙扎。
我,單純的想以一個土生土長的台灣人,從沒喝過洋墨水,到了墨爾本遇到的文化衝突,整理了八個重點跟大家分享。或許很多談論的內容不僅僅會在墨爾本發生,而是就根本東方與西方社會的不同,當然這也跟我本人無哩頭以及有點天真的個性有關啦,所以常常鬧笑話哈哈哈,不過還是希望能讓有心要到墨爾本旅行,或是西方國家居住的朋友們有一些心裡上的準備喲。
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【巴黎 VLOG 🇫🇷# 2 】三天兩夜巴黎怎麼玩?連法國人都說我行程排超好!
https://youtu.be/htRjtSfEeCU
【法國 VLOG 🇫🇷# 3 】憑什麼波爾多是最佳旅遊城市第一名?法國人是有多愛請我喝酒?😂
https://youtu.be/Mjm8_CKqGKg
【 七分鐘看懂澳洲墨爾本 】到底是怎麼樣的一個城市?
https://youtu.be/MoULaQuA-nE
【 我愛台灣 】為什麼澳洲墨爾本的朋友羨慕我是台灣人?
https://youtu.be/d9YRiBkNXUw&t
【 墨爾本打工度假 】我是台灣人,遇到的文化差異。約喝咖啡其實想撩你?
https://youtu.be/mwRFkmUHa98&t
【Mickey愛台灣】外國朋友來找我,啊!要去哪玩?
https://youtu.be/wOPLolM4UrA
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?多謝收看。不標準的發音,請見諒。 ??。廣東話部份O係後面。
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【故事】
忽然想寫點什麼的。Just for fun。
標題便叫做「拿着劍的人」吧。
深秋一個暗藍色的天空下的午後出現短暫和緩的陽光。
人客稀少的咖啡室內正播放著柔和的輕音樂。淡淡的墨西哥咖啡豆香味彌漫在室內。
兩個人正坐在一角喝著咖啡。
靜兒問:「我想知道他在想什麼?」
寶劍皇后說:「妳是指妳的對象嗎?」
「是的。」
寶劍皇后稍微沉默了一會兒然後說:「雖然他曾經對妳有好感。不過突如其來的改變,似乎是客觀的問題,最近他似乎冷落了妳啊。」
靜兒:「確實是這樣。但過去他好像對我很有興趣似的。」
寶劍皇后說:「但那是過去的事了。」
靜兒說:「才沒多久之前的事呀。」
「但人會變啊。」
「會變得這麼快嗎 !?不到三個月的事情。」
靜兒接著說:「他是不是對其他人有了興趣。或者已經有另一半?」
寶劍皇后把她的寶劍拿出來,眼神稍微改變了地望著她的寶劍。而寶劍似乎輕微地晃動着。
時間忽然之間好像也一下子緩慢下來似的。
整間咖啡室的人也無聲地等待寶劍晃動完畢。
寶劍皇后然後說:「似乎不是啊。我的寶劍並沒有感覺到他有另一半的跡象。最多...」
靜兒說:「最多什麼!?」
寶劍皇后把咖啡杯拿起來,喝了一口,然後把杯放回桌子上,接著說:「最多也只是可能在忙着工作的事情。確實情感的元素並沒有太多,而且...」
靜兒說:「而且什麼!?還未答我他在想什麼?」
雖然靜兒有點激動,但寶劍皇后可以理解的,畢竟感情的事影響到她情緒不好啊。
寶劍皇后說: 「而且他連自己也不太知道自己在想什麼。似乎混亂着啊。他似乎想自己一個人安靜一下。而且您們最近關係走向也不太有利 ...」
靜兒說:「無可能!他不會這樣想的。為什麼妳的推測總是這樣負面的。」
寶劍皇后又再呷了一口咖啡。接著說:
「妳可以直接打電話去問他啊。雖然他未必會承認。」
靜兒:「……」
靜兒稍微低著頭說:「不好意思,剛剛有點激動。」
寶劍皇后:「我也很抱歉,忘記問妳想要直接的說明還是間接的。只想直接說明客觀看到占卜的事情發展。」
靜兒說:「明白。好的。那我不打擾皇后妳了。我還有點事做,先走了。謝謝。Bless you」
寶劍皇后:「Bless you too」
靜兒起身,然後把椅子放回原處。然後走到咖啡店門前,回頭說:
「是了,皇后這裡是公眾場所,妳下次還是不要帶寶劍出來吧。」
「……」
THE END
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對我來說是一個很大的支持。感激 ??。不標準的普通話,請見諒。
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【占卜】
塔羅占卜愛情 我應該放棄這個人嗎❓
https://youtu.be/srpCCljTSoQ
塔羅占卜愛情 我和她/他的關係狀況發展走向❓
https://youtu.be/5Lgx3E4u7Ug
塔羅占卜愛情 會有新的對象嗎❓
https://youtu.be/2zaDt7p7ack
塔羅占卜 八月份整體運勢❓
https://youtu.be/OhOxJeEVS3w
塔羅占卜 愛情 她/他在乎我嗎❓
https://youtu.be/pTC2AwpJE5A
塔羅占卜愛情 和她/他關係發展阻力在那❓
https://youtu.be/3o94q06QpJ8
塔羅占卜 愛情 她/他喜歡我嗎❓有多喜歡...
https://youtu.be/rnnMCtpqBGM
塔羅占卜 愛情 她/他會找我嗎❓
https://youtu.be/A-qVwHwgQKQ
愛情 YES or NO 有成功的機會嗎❓【五揀一】
https://youtu.be/cyv84DWhwhM
7-8月 工作事業發展情況❓
https://youtu.be/Y3F6V71rcuU
我和暗戀對象有機會嗎❓
https://youtu.be/3EiDfaZyiQg
她/他對我的看法和下一步行動❓
https://youtu.be/2Lrr3mAU1Ig
我和前任復合的關係情況❓
https://youtu.be/v2zUzMjena0
?這是大範圍性的占算。只供參考和啟示。
西方墨點法怎麼看 在 【任圃講科普】58什麼是電泳?什麼是南方、北方與西方墨點法? 的八卦
【任圃講科普】58什麼是電泳?什麼是南方、北方與 西方墨點法 ?在生物技術中,DNA電泳、RNA電泳與蛋白質電泳是很常使用的技術,也可見於許多的新聞報導 ... ... <看更多>
西方墨點法怎麼看 在 [求救] 有關western blot 問題請大家幫幫忙- 看板Biotech 的八卦
大家好 因為工作所以開始接觸western blot 大約快兩個月
之前只有在教科書紙上談兵
現在用的protocol是實驗室建立起來的 當初有看實驗室的人做過
但是大約做了兩個月的我 一直有幾個問題 搞不定 弄的自己心煩老師也不耐煩
想請各位高手指點一下問題到底出在哪邊?
1.首先在收蛋白質部分 我收的量每次都低於200ug?
先講我的方法: 我將"10 cm dish" "八成"滿且細胞不是很大的dish,去medium,
wash PBS,在去掉PBS,後加入1ml的PBS,刮下(有用顯微鏡確認都刮下)
離心5000rpm 5min,去PBS後依照pellet加入MENT+Protein inhibitor
cocktail(1000:10)大約都加50-100ul並打很散,而後放在冰上每十分
鐘又去強力衝pellet,共30分鐘,而後甚至放到-80度冷凍15分鐘在解凍
(現在我還加上sonicate 10分鐘 每十秒休息五秒然後13000rpm 30分鐘
吸上清液(有小心不吸到pellet)只是有時候液面好像有一層膜,那到底
是什麼東西?
之後就2ulsample protein+ 18ul ddw +480 ul Bio-rad protein assay
測吸光值每次R大約在0.975-0.995(每次都做standard)
但每次我的蛋白質量都低於200ug.....真的很想哭 每次做三次就沒了?
到底問題出在哪邊呢,實驗室每個人也是這樣做 他們都可以收到500ug以
上,請大家幫幫忙 謝謝
2.再者更嚴重的問題是,到目前為止 我的tubulin 總是不會等量 真的除了手殘外
沒有其他原因了嗎?到目前不下跑過20多遍的western blot,但每次的tubulin都不
equal,所以每次壓出來想看的蛋白都無法比較,讓老闆非常不滿.
我還是把我的作法講一下 請大家提點一下,其中有幾個小問題 也麻煩大家解答一下
我會算好50ug蛋白所需要的ul加入4xdye,補lysis buff都到40ul離心,夾防爆夾煮沸
10min,放冰上,再離心,然後加入well內,問題來了,明明我每個sample理論上應該都是
40ul但是每次在pillet入well時都不到40ul,我問我同事他們說裡應該都超過,但為什
麼我會不足?(我有確定並沒有加錯或是沒有加到)所以到底為什麼會不足呢?
之後跑80V 5%stacking gel理論上應該我的loading的sample應該此時都聚集一條線,
而後才會進入10%的下膠但是我發現我們家跑的都有拖很長(大約3/4個well長度),一直
到下膠跑到最後的1/4處才會慢慢壓成一條線?請問這是正常的嗎?是哪邊出了問題?
這會影響到我的結果嗎?
之後就用300mA轉3小時然後blocking 1hr,wash three times,加入一抗4度overnight
隔天wash three times, 二抗一小時,wash theree times again然後ECL顯影
然後心情就開始不好了......因為tubulin都不equal(因為我要壓的有在20-30kb
所以沒壓actin
很感謝你把這篇文章看到這邊,如果你有任何想法或是哪邊有問題,我會馬上再解釋清楚
也希望你覺得我哪邊可以怎麼做 也麻煩你解答一下...十分感激你
謝謝大家
--
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◆ From: 123.205.33.179
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